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丹麦Exiqon生产的miRNA芯片多年来被大量国际一流杂志引用,是同类产品中国际公认度最高的品牌.由于Exiqon试用基于LNA%26#8482;专利技术的捕获探针,使其生产的miRNA芯片表现出同类产品无可比拟的优异品质.上海康成独家代理Exiqon miRCURY%26#8482; LNA microRNA芯片并提供相关的技术服务已经有四年的丰富经验,实验系统可靠稳定.
康成生物提供miRNA 芯片技术服务的主要实验流程如下:
1、样品RNA 抽提
a. 实验对象为组织样品，取适量（50-100mg）新鲜组织样品或正确保存的组织样品，使用BioPulverizerTM冰冻粉碎组织，加1ml的RNA抽提试剂Trizol（Invitrogen），使用Mini-Bead-Beater-16匀浆后抽提RNA。
b. 实验对象为细胞样品，每份样品取1×106～1×107细胞，加1ml的RNA抽提试剂Trizol（样品为贴壁细胞，每10cm2培养皿Trizol使用量为1ml），裂解后抽提RNA。
2. RNA 质量检测
a．使用Nanodrop测定RNA 在分光光度计260nm 、280nm和230nm的吸收值，以计算浓度并评估纯度。
b．用甲醛电泳试剂进行变性琼脂糖凝胶电泳，检测RNA 纯度及完整性。
c.提供RNA QC报告。
注意：用于芯片检测的RNA 样品，必须是高质量的，完整的，没有RNase污染（降解的样品不能用于标记和芯片检测），没有基因组污染。
3. 制备荧光标记探针
采用miRCURY%26#8482; Array Power 标记试剂盒，用标记酶将Hy3%26#8482;或Hy5%26#8482;荧光基团标记miRNA,可以得到用于与芯片杂交的荧光探针。
4. 芯片杂交
在标准条件下使用PhalanxTM的热收缩杂交袋将标记好的探针和miRCURY%26#8482;芯片杂交。
5. 图像采集和数据分析
使用GenePix 4000B 芯片扫描仪扫描芯片的荧光强度，并将实验结果转换成数字型数据保存，使用配套软件对原始数据进行分析运算。
6. 提供实验报告
包括详细的实验方法和芯片实验数据和图表。
康成生物
陈冠豪
800-820-5058
T:021-64451989-807
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Web: www.kangchen.com.cn
[ 本帖最后由 康成老陈 于 2008-8-13 11:19 编辑 ]
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